2-氯乙醇通過(guò)MAPK信號途徑誘導原代培養的大鼠星形細胞中基質(zhì)金屬蛋白酶-2的上調
本研究旨在探索1,2-二氯乙烷(1,2-DCE)誘發(fā)腦水腫的機制,重點(diǎn)關(guān)注體內1,2-DCE的中間代謝產(chǎn)物2-氯乙醇(2-CE)對大鼠星形膠質(zhì)細胞的基質(zhì)金屬蛋白酶-2(MMP-2)的改變。MMP-2的蛋白和mRNA水平,以及p38 MAPK的磷酸化蛋白水平。
暴露于2-CE的原代培養星形細胞中MMP-2蛋白和mRNA水平的變化。(A)MMP-2的免疫熒光染色(400×)。A:對照;B:7.5mM劑量;C。15mM劑量;d:30mM劑量的2-CE。(B) 西方印跡分析。圖片是每組三個(gè)獨立實(shí)驗的代表結果。(C) MMP-2的西方印跡的密度分析。與β-肌動(dòng)蛋白相比,相對強度以任意單位表示,并以與對照組相比的折疊變化表示。(D)通過(guò)實(shí)時(shí)RT-PCR對MMP-2 mRNA進(jìn)行定量?;虮磉_與GAPDH標準化,并以與對照組相比的倍數變化表示。以平均數±SD表示的數據是每個(gè)處理方法的不同窩大鼠的三個(gè)獨立實(shí)驗的結果,并進(jìn)行分析。單向方差分析。顯著(zhù)性差異被定義為P < 0.05,* ,與對照組相比;# ,與7.5 mM劑量相比。
p38參與了暴露于2-CE的原代培養星形細胞中MMP-2的誘導。I到VII分別代表空白對照組、溶劑對照組、抑制劑對照組、暴露組和SB202190的低、中、高劑量抑制組。(A) 西方印跡分析。圖片是每組三個(gè)獨立實(shí)驗的代表結果。(B) 西方印跡的密度分析。與β-肌動(dòng)蛋白相比,相對強度以任意單位表示,并以與對照組相比的折疊變化表示。(C) 通過(guò)實(shí)時(shí)RT-PCR對mRNA進(jìn)行定量?;虮磉_與GAPDH標準化,并以與對照組相比的倍數變化表示。以平均值±SD表示的數據是每個(gè)處理方法的不同窩大鼠的三個(gè)獨立實(shí)驗的結果,并通過(guò)單因素方差分析。顯著(zhù)性差異定義為P < 0.05,* ,與空白對照組相比;+ ,與暴露組相比;# ,與低劑量干預組相比;& ,與中劑量干預組相比。
JNK在暴露于2-CE的原代培養星形細胞中誘導MMP-2的參與情況。I到VII分別代表空白對照組、溶劑對照組、抑制劑對照組、暴露組和低、中、高劑量的SP600125抑制組。(A) 西方印跡分析。圖片是每組三個(gè)獨立實(shí)驗的代表結果。(B) 西方印跡的密度分析。與β-肌動(dòng)蛋白相比,相對強度以任意單位表示,并以與對照組相比的折疊變化表示。(C) 通過(guò)實(shí)時(shí)RT-PCR對mRNA進(jìn)行定量?;虮磉_與GAPDH標準化,并以與對照組相比的倍數變化表示。以平均值±SD表示的數據是每個(gè)處理方法的不同窩大鼠的三個(gè)獨立實(shí)驗的結果,并通過(guò)單因素方差分析。顯著(zhù)性差異定義為P < 0.05,* ,與空白對照組相比;+ ,與暴露組相比;# ,與低劑量干預組相比;& ,與中劑量干預組相比。